據(jù)美國約翰斯·霍普金斯大學(xué)實時數(shù)據(jù)統(tǒng)計，截至北京時間22日早上6時38分，全球新冠肺炎（COVID-19）確診病例已超256萬，死亡病例達176926例。

迄今為止的科學(xué)研究表明，新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）已經(jīng)發(fā)生變異，至于這種變異將產(chǎn)生怎樣的影響，目前尚無定論。

4月20日，由中國工程院院士李蘭娟領(lǐng)銜發(fā)布在預(yù)印本網(wǎng)站medRxiv（未經(jīng)同行評審）上的一項研究報告指出，SARS-CoV-2已經(jīng)獲得了能夠?qū)嵸|(zhì)性改變其致病性功能的突變，并且不同變異毒株病毒載量方面的差異可達270倍。

https://doi.org/10.1101/2020.04.14.20060160

研究人員采集了2020年1月22日至2020年2月4日期間被收治在浙江大學(xué)附屬醫(yī)院的11位COVID-19患者的病毒樣本。其中8人為男性患者，3人為女性患者，年齡在4個月至71歲之間，除年齡最小的患者為輕度癥狀外，其余10名患者均為中癥或重癥患者。

為了探究這11個病毒分離株的突變譜，研究人員對它們進行了超深度測序，并將所得結(jié)果與全球共享流感數(shù)據(jù)倡議組織(GISAID)中的1111個基因組序列進行了比較，發(fā)現(xiàn)這些分離株上共存在33個突變，其中有19個是首次發(fā)現(xiàn)的全新突變。盡管樣本數(shù)量較少，但是從分析結(jié)果來看，病毒存在豐富的變異多樣性，這說明新冠毒株的真正多樣性在很大程度上仍然沒有被充分認識。

11個病毒分離株上的每一個突變總結(jié)，藍色標記意味著新的突變

不過，最關(guān)鍵的問題在于，病毒的突變將對病毒的致病性功能產(chǎn)生怎樣的影響？

由于COVID-19患者可能會因年齡、身體狀況等因素而出現(xiàn)不同的感染癥狀，因此，為了更客觀地評估這些突變對病毒致病性的影響，研究人員選擇了Vero-E6細胞系進行體外感染性試驗。這種細胞系的ACE2蛋白與人體內(nèi)的非常相似，而ACE2是SARS-CoV-2進入人體細胞所需的受體，因此能夠提供SARS-CoV-2感染細胞系的直接證據(jù)。

研究人員使用從這11名患者身上獲取的SARS-CoV-2分離株分別感染了Vero-E6細胞，之后每隔一段時間采集細胞并檢測細胞的病毒載量。觀察結(jié)果表明，隨著時間的推移，新冠病毒株在病毒載量方面表現(xiàn)出顯著差異，并且在24小時這一節(jié)點上，不同病毒株的病毒載量最高差異可達270倍！

當感染Vero-E6細胞時，患者來源的SARS-CoV-2分離株的病毒載量存在時間變化。

那么，病毒載量越高，是否意味著更大的細胞死亡風險呢？

在接下來的實驗中，研究人員使用DIC顯微鏡觀察了48小時和72小時這兩個時間節(jié)點上的細胞病變效應(yīng)（CPE），這是一種病毒大量繁殖導(dǎo)致細胞病變甚至死亡的情況。結(jié)果顯示，CPE與病毒載量數(shù)據(jù)高度一致，表明病毒載量越高，細胞死亡率越高。

CPE的變化與病毒載量（CT）密切相關(guān)。A為每個時間點觀察到病毒載量的顯著變化，B中箭頭所指細胞正在溶解，C為CPE與CT之間的關(guān)系。

值得注意的是，從第11號患者（ZJU-11）身上分離的病毒株出現(xiàn)了三核苷酸突變，并且這種突變似乎在后續(xù)實驗中使毒株的復(fù)制速率和致病力大大提升，患者的陽性檢測結(jié)果維持了45天。研究人員認為，這種突變對病毒致病性功能的影響值得研究。

總之，這項研究提供了直接的證據(jù)，證明目前在SARS-CoV-2基因組中發(fā)生的突變具有影響病毒致病性的功能潛力。因此，除了積累基因組測序數(shù)據(jù)外，研究人員還應(yīng)盡可能在細胞水平上進行病毒監(jiān)測。盡管研發(fā)COVID-19藥物和疫苗迫在眉睫，但仍需考慮到這些累積的突變，以避免潛在的陷阱。

參考資料：

[1] Patient-derived mutations impact pathogenicity of SARS-CoV-2.

[2] 李蘭娟新發(fā)論文：找到新冠病毒19個致病性新突變！

原標題：李蘭娟團隊：SARS-CoV-2出現(xiàn)可改變其致病性的突變，體外感染最大顯示270倍差異