2018年諾貝爾醫(yī)學(xué)生理學(xué)獎(jiǎng)，花落TasukuHonjo和James Pallision和兩位科學(xué)家，以表彰他們?cè)诎┌Y免疫負(fù)調(diào)控機(jī)制中PD-1和CTLA-4研究中所取得的成就。

自2015年首個(gè)PD-1抗體藥物上市以來，以PD-1為基礎(chǔ)的臨床用藥研究也已獲得令人振奮的數(shù)據(jù)，越來越多的人對(duì)腫瘤免疫治療抱有極大信心，PD-1研究浪潮迭起，無疑是腫瘤免疫研究最火熱的一個(gè)方向。

今年夏天，O藥和K藥相繼獲NMPA（CFDA）批準(zhǔn)于國內(nèi)上市。同時(shí)國內(nèi)也有100多家藥企扎堆其中，競爭相當(dāng)激烈。目前已有4家提交了上市申請(qǐng)，分別是恒瑞的SHR-1210，君實(shí)的JS001，信達(dá)生物的IBI308以及百濟(jì)神州的BGB-A317。

然而，這一切繁榮熙攘背后，很多問題就有可能被掩蓋。PD-1的研發(fā)，無論從市場層面還是從技術(shù)層面都還是有不足的。其局限主要是：

01

PD-(L)1單抗已獲批適應(yīng)癥雖超過十二種，是當(dāng)之無愧的廣譜抗腫瘤藥，但也并非萬能，依然還有尚未被征服的癌種。

02

存在原發(fā)性耐藥和獲得性耐藥。對(duì)于耐藥或復(fù)發(fā)的相關(guān)機(jī)制，主要?dú)w納為以下幾點(diǎn)：

1.腫瘤免疫原性的因素（可以用TMB衡量）

2.抗原呈遞和T細(xì)胞激活的因素

3.抑制性受體的高表達(dá)和非PD-1依賴途徑導(dǎo)致的T細(xì)胞耗竭

03

在臨床的使用過程中發(fā)現(xiàn)，PD-(L)1療法雖然卓有成效，但個(gè)體差異很大，部分患者獲得了顯著的效果，但部分患者無效。

K藥與O藥獲批適應(yīng)癥及臨床試驗(yàn)有效率一覽表

今天，小編為大家?guī)淼腛X40是除PD-1外的另一個(gè)明星靶點(diǎn)，雖尚無抗體藥物上市，但也仍是亟待開發(fā)的藍(lán)海，目前正成為各大醫(yī)藥公司想要快速搶占的戰(zhàn)略高地。

OX40

OX40 (CD134, TNFRSF4) ，最初被定義為T細(xì)胞活化標(biāo)記物，后發(fā)現(xiàn)是具有共激活功能的NGFR/TNFR超家族成員。

OX40基因位于人1號(hào)染色體（小鼠4號(hào)染色體），編碼一種50kD的一型跨膜糖蛋白。胞外區(qū)有191個(gè)氨基酸，包含了三個(gè)完整的以及一個(gè)稍短的富含半胱氨酸結(jié)構(gòu)域（CRDs）。主要在活化的效應(yīng)T細(xì)胞（Teffs）和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）上表達(dá)，也在NKT細(xì)胞，NK細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞上表達(dá)。

OX40L

OX40與配體OX40L（CD252, TNFSF4）結(jié)合傳遞共刺激信號(hào)。OX40L基因位于人和小鼠的1號(hào)染色體，編碼34kD 的二型跨膜糖蛋白。OX40L可在抗原提呈細(xì)胞（APC），如：B細(xì)胞、樹突細(xì)胞、巨噬細(xì)胞上表達(dá)；另外在其它細(xì)胞類型如Langerhans細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、肥大細(xì)胞、和NK細(xì)胞也可誘導(dǎo)表達(dá)。可見OX40和OX40L的結(jié)合參與了T細(xì)胞與淋巴細(xì)胞和非淋巴細(xì)胞之間多種生理反應(yīng)。

OX40的免疫功能

OX40和OX40L的相互作用能夠在OX40的胞內(nèi)區(qū)域內(nèi)招募TNFR相關(guān)(TRAFs)分子，形成包含IKKα和IKKβ以及PI3k和PKB（Akt）的信號(hào)傳導(dǎo)復(fù)合物；OX40還與TCR信號(hào)協(xié)同作用，通過未知機(jī)制增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)Ca2+，從而增強(qiáng)NFAT入核。OX40可激活經(jīng)典的NF-κB1途徑或非經(jīng)典的NF-κB2途徑、PI3k/PKB和NFAT途徑，進(jìn)而調(diào)控制T細(xì)胞分裂和存活的基因，以及促進(jìn)細(xì)胞因子基因的轉(zhuǎn)錄以及細(xì)胞因子受體的表達(dá)，對(duì)于細(xì)胞存活至關(guān)重要。OX40信號(hào)傳導(dǎo)會(huì)引起包括CTLA-4和Foxp3的下調(diào)。

Fig1. OX40/OX40L相互作用影響T細(xì)胞壽命的四個(gè)階段

(圖片來自Semin Oncol. 2010 Oct;37(5):524-32.)

當(dāng)OX40與其配體OX40L結(jié)合時(shí)，有助于提高免疫系統(tǒng)應(yīng)答能力：

1.增加效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞的存活和擴(kuò)增，增加細(xì)胞因子（例如IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ）的分泌；

2.降低Tregs的免疫抑制活性，進(jìn)一步放大T細(xì)胞活化效應(yīng)。

在腫瘤微環(huán)境中，免疫激活可導(dǎo)致OX40表達(dá)?？稍鰪?qiáng)效應(yīng)T細(xì)胞的活化和增殖，并抑制Tregs，從而導(dǎo)致復(fù)雜的抗腫瘤免疫反應(yīng)。

Fig2. 體外及體內(nèi)抗OX40的作用機(jī)制對(duì)比

（圖片來自Eur J Cancer. 2016 Jan;52:50-66.）

若將PD1抑制劑的作用比作為對(duì)免疫系統(tǒng)「松開剎車」，那么Anti-OX40激動(dòng)型抗體則是對(duì)免疫系統(tǒng)「踩下油門」。目前，多種Anti-OX40抗體藥物正在用于針對(duì)腫瘤及免疫系統(tǒng)疾病的臨床試驗(yàn)。

(數(shù)據(jù)來源于醫(yī)藥魔方Info)

就在19日，我國首個(gè)OX40單抗完成臨床登記。

01

主要及次要目的

主要目的：

評(píng)估IBI101單藥或聯(lián)合信迪利單抗在晚期實(shí)體瘤受試者中的耐受性和安全性；

次要目的：

評(píng)估IBI101單藥或聯(lián)合信迪利單抗在晚期實(shí)體瘤受試者中的抗腫瘤活性、PK特征、PD指標(biāo)及免疫原性；

02

探索性目的

探索使用免疫實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)IBI101單藥或聯(lián)合信迪利單抗在晚期實(shí)體瘤受試者中的療效進(jìn)行評(píng)估,探索療效相關(guān)的生物標(biāo)志物。

該試驗(yàn)PI為中山大學(xué)腫瘤防治中心，徐瑞華博士。

OX40人源化小鼠

基于以上所介紹的OX40相關(guān)研究背景，為進(jìn)一步推進(jìn)OX40藥物發(fā)展，可利用其作用機(jī)制，以人源化小鼠為基礎(chǔ)，為腫瘤免疫藥物作藥效評(píng)價(jià)。

此舉不僅可以對(duì)疾病發(fā)生機(jī)理和潛在機(jī)制進(jìn)行深入探討，還能為小鼠體內(nèi)進(jìn)行的藥物實(shí)驗(yàn)提供篩選開發(fā)和測(cè)試評(píng)價(jià)，大大加快OX40靶向藥物的研究開發(fā)與臨床試驗(yàn)進(jìn)展，減少了臨床前測(cè)試的時(shí)間成本，同時(shí)也降低了開發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。

利用人源化小鼠模型最終有可能實(shí)現(xiàn)臨床上真正“個(gè)性化”醫(yī)療的目的。

鑒于免疫檢查點(diǎn)人源化小鼠在腫瘤免疫藥物研發(fā)方面具有的獨(dú)特作用，上海南方模式生物科技股份有限公司（Shanghai Model Organisms Center，Inc.，簡稱“南模生物”）自主研發(fā)了OX40人源化小鼠模型為深入研究與OX40相關(guān)的藥物功效、效能和安全性檢測(cè)提供了強(qiáng)有力的工具。

與傳統(tǒng)的免疫缺陷小鼠不同，它不僅攜帶了人類的OX40，而且還具有完整的免疫系統(tǒng)，因此是更相關(guān)、更可靠、更準(zhǔn)確的理想模型。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié)果驗(yàn)證

01

FACS表達(dá)驗(yàn)證

OX40人源化雜合子小鼠脾臟淋巴細(xì)胞經(jīng)anti-CD3和antiCD28刺激48h后收集細(xì)胞染色，同時(shí)設(shè)立不刺激組，F(xiàn)ACS檢測(cè)鼠源和人源OX40表達(dá)。

Fig3 FACS檢測(cè)OX40人源化小鼠脾臟淋巴細(xì)胞人源OX40的表達(dá)

結(jié)果顯示：OX40人源化雜合子小鼠活化的CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞中均可以檢測(cè)到人源OX40的表達(dá)，并且人源OX40和鼠源Ox40表達(dá)趨勢(shì)類似。

02

抗腫瘤藥效驗(yàn)證

OX40人源化雜合子小鼠接種MC38結(jié)腸癌細(xì)胞系，腫瘤生長至約100mm3，隨機(jī)將動(dòng)物分組為對(duì)照組和治療組（n=8）。

Fig4 OX40人源化小鼠MC38荷瘤模型體內(nèi)抗腫瘤藥效驗(yàn)證

結(jié)果顯示：針對(duì)人的OX40抗體顯示出非常顯著的抗腫瘤效果（p<0.001）。

上述數(shù)據(jù)證明：

OX40-HU（OX40人源化）小鼠模型，是評(píng)估體內(nèi)Anti-OX40抗體藥效的有效工具。

為了增加抗OX40的效果，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間將OX40途徑與其他可能互補(bǔ)的免疫途徑結(jié)合，可能是更有效激活抗腫瘤免疫應(yīng)答的關(guān)鍵策略，聯(lián)合療法研究應(yīng)運(yùn)而生，目前南模生物也自主研發(fā)了OX40與其他靶點(diǎn)的雙人源化及三人源化模型小鼠，以解決該部分臨床前研究需求。

南模生物針對(duì)OX40等眾多靶點(diǎn)成功開發(fā)的人源化小鼠，為國內(nèi)進(jìn)行靶向藥物研發(fā)的單位提供了更專業(yè)先進(jìn)的動(dòng)物模型，極大程度上推進(jìn)了一系列靶向藥物藥效評(píng)價(jià)進(jìn)展，節(jié)約了臨床前評(píng)價(jià)測(cè)試所消耗的大量時(shí)間。

同時(shí)，基于該小鼠模型的篩選開發(fā)與測(cè)試評(píng)價(jià)，降低了藥物研發(fā)的潛在風(fēng)險(xiǎn)，將會(huì)助力企業(yè)及科研單位在免疫治療方向盡早取得新突破，為更多腫瘤及免疫系統(tǒng)疾病患者帶來希望。

上海南方模式生物科技股份有限公司

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