文：科志康

基因療法用于治療一些難以治療的遺傳疾病，其潛力非常誘人，但現(xiàn)在有一種產(chǎn)品被懷疑會引發(fā)嚴重的安全問題。

（左圖是SCID患者-泡泡男孩，因為免疫系統(tǒng)嚴重受損，必須生活在無菌“泡泡”中；右圖是攜帶正確基因拷貝的載體-來源GSK）

10月30日，Orchard Therapeutics公司表示，其基因療法Strimvelis被懷疑導致了一名患者的白血病，該療法于2016年獲得EMA批準，用于治療罕見的遺傳性ADA-SCID。ADA-SCID是一種以制造腺苷脫氨酶（ADA）酶的基因突變?yōu)闃酥镜募膊?，ADA酶對維持正常白細胞至關重要。ADA-SCID患者的免疫系統(tǒng)功能紊亂，如果不進行有效干預，患者壽命不超過兩年。

Orchard說：“初步研究結果表明，這一診斷可能與用Strimvelis治療相關聯(lián)的插入性事件所致。”目前正在調(diào)查是否確實存在因果關系。

自2016年獲得歐盟批準后，原開發(fā)商葛蘭素史克公司（GlaxoSmithKline，GSK）僅給16名患者進行了Stimvelis治療。這名患白血病的患者顯然是在2016年一個葛蘭素史克同情用藥計劃中接受了治療。Orchard說，在調(diào)查完成之前，不會有更多患者接受治療。這種藥從未在美國獲得批準。

2018年Orchard從GSK購買了Strimvelis，它為找不到匹配干細胞捐獻者的患者提供了一個選擇。其工作原理是用功能性ADA基因編輯患者自己的造血干細胞。然后把這些細胞回輸入患者骨髓中，發(fā)育成熟后產(chǎn)生正常的ADA蛋白。

該療法使用一種γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒作為功能性ADA基因的載體。問題是，逆轉(zhuǎn)錄病毒可以將自己的基因信息整合到人類基因組中，引起意外突變，從而導致癌癥。它是一種已知的基于γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的基因治療的危險因素，在EMA批準中被描述為Stimvelis的重要潛在風險之一。

除了Strimvelis，Orchard還開發(fā)了OTL-101，它使用慢病毒將ADA基因的功能拷貝插入患者細胞。該藥目前正在進行注冊試驗，并已獲得FDA的突破性和孤兒藥指定。Orchard說，Orchard的所有候選基因治療藥物都使用慢病毒載體，這些載體是“專門設計用來避免給藥后發(fā)生插入性癌變”的。目前還沒有報告關于慢病毒載體干細胞基因治療的危險基因插入。

擴展閱讀1：

除骨髓移植外，能用于治療ADA-SCID的藥物：

1) 1990年獲批的Adagen（pegademase bovine）聚乙二醇修飾的來源于牛的腺苷脫氨酶，用于治療伴有腺苷脫氨酶缺乏的嚴重聯(lián)合免疫缺陷病。

2) 2018年10月，F(xiàn)DA批準了Leadiant Biosciences公司的Revcovi (elapegademase-lvlr)，一種重組腺苷脫氨酶，用于治療ADA-SCID兒童和成人患者。

擴展閱讀2：

筆者整理了幾種常用于細胞和基因療法的病毒載體及其在上市藥物中的實際運用：

1、腺相關病毒：腺相關病毒（AAV）屬于微小病毒科依賴病毒屬,是目前發(fā)現(xiàn)的一類結構最簡單的單鏈DNA（ssDNA）缺陷型病毒，需要輔助病毒（通常為腺病毒）參與復制，重組腺相關病毒載體源于非致病的野生腺相關病毒，安全性好、宿主細胞范圍廣(分裂和非分裂細胞)、免疫源性低，在體內(nèi)表達外源基因時間長（6個月以上），在世界范圍內(nèi)的基因治療和疫苗研究中得到廣泛應用。目前還未發(fā)現(xiàn)AAV引起疾病，也不會引發(fā)主要的免疫系統(tǒng)反應。

上市藥物：目前有三款，分別是UniQure公司的Glybera（AAV1），Spark Therapeutics公司（后被羅氏收購）的Luxturna（AAV2）和諾華（AveXis）的Zolgensma（AAV9）。

2、腺病毒：腺病毒（AdV）是無包膜的雙鏈DNA（dsDNA），也是用于人類的第一種病毒基因傳遞載體，一些種類的腺病毒在人體中毒力低或無毒力，并且對于分裂和非分裂細胞均具有高轉(zhuǎn)導效率，腺病毒不能整合到宿主基因組，使其具有非常低的插入突變風險，也因為不能整合入宿主細胞，所以只能短暫表達（3周），且腺病毒某些自身抗原的表達會引起人體免疫反應，阻止其重復轉(zhuǎn)導。腺病毒載體已經(jīng)被用于溶瘤治療以及疫苗抗原的表達。

上市藥物：全球首個上市的溶瘤病毒藥物為我國的安柯瑞（Oncorine，重組人5型腺病毒注射液）。

3、慢病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒都屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒，為單鏈RNA（ssRNA），能隨機整合至宿主細胞染色體內(nèi)并穩(wěn)定遺傳。區(qū)別在于慢病毒載體病毒原型是HIV-1(人類免疫缺陷Ⅰ型病毒)，其結構和基因組比其他逆轉(zhuǎn)錄病毒復雜，容量大。

上市藥物：美國已經(jīng)上市的三個靶向CD19的CAR-T藥物，諾華的Kymriah采用慢病毒作為載體；吉利德（Kite）的Yescarta和Tecartus用的是復制缺陷γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體PG13-CD19-H3。